原装进口FITC-Phalloidin FITC标记的鬼笔环肽(鬼笔鹅膏素)现货
产品名称 |
产品编号 |
生产商 |
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规格 |
单价 |
Phalloidin
(FITC) FITC标记的鬼笔环肽 |
ALX-350-268-MC01 |
Enzo
(Alexis/Biomol/Assay Designs) |
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0.1 mg |
2692 |
贮存液配制
0.1mg FITC-Phalloidin 溶于0.5ml 无水甲醇 (或DMSO),配成200 μg/ml 贮存液。分装冻存于-20oC,干燥、避光保存至少一年。
染色方法
1. 细胞爬片生长24-48 小时;
2. 预温PBS(37 oC)清洗细胞2 次,每次10 分钟;
3. 4%多聚甲醛室温固定5-10 分钟,PBS
清洗细胞3 次;
【备注】也可用3.7%的甲醛溶液固定,但甲醛中不能含有甲醇,因为在固定过程中甲醇可能会破坏肌动蛋白。
4. 0.1%Triton
X-100/PBS 室温破膜3-5 分钟,PBS 清洗细胞3 次;
【备注】该步骤可以省略,因为Phalloidin 分子量很小,多聚甲醛固定后细胞膜产生的孔洞足以让Phalloidin 进入细胞。且经Triton 破膜后,Phalloidin 可能对细胞核有非特异性染色。
5. 5 μl FITC-Phalloidin 贮存液加入150 ul PBS 中配成工作液 (5 μg/ml )并用以染细胞,室温染色30-60 分钟;1) FITC-Phalloidin 工作浓度范围为2-50 μg/ml,一般使用浓度为5 μg/ml;2) 为降低非特异性染色,配制FITC-Phalloidin 工作液时,可在PBS 中加入1% BSA(牛血清白蛋白)。或者在染FITC-Phalloidin 前用含1% BSA 的PBS 液室温封闭细胞20-30分钟。 3)为防止染色过程中液体的蒸发,最好在密闭的湿盒内进行。
6. PBS 清洗细胞3 次;
7. 吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油)封片,荧光或共聚焦显微镜下观察。
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产品名称 |
产品编号 |
生产商 |
规格 |
Phalloidin鬼笔环肽 Actin ligand Isolated
from Amanita phalloides mushrooms |
ALX-350-265-M001 |
Enzo
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1mg |
Phallacidin Actin ligand 类鬼笔毒环肽 Isolated
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